DAPI(4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
本产品为DAPI水溶液,纯度≥90%,浓度为1mg/mL。使用时根据实验不同直接将本产品用相应溶液稀释到工作浓度。
使用方法:(仅供参考)
对于培养细胞
1、取适量DAPI水溶液加到PBS中,制备成5-15 μg/mL的DAPI溶液。
2、将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。
3、在37℃培养细胞10-20分钟。
4、用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
5、置于荧光显微镜下观察,激发波长360-400nm。
对于组织切片
制好的玻片上滴加几滴稀释的DAPI染液,染色10分钟,流水冲去染液,滤纸吸除多余水分,加一滴荧光封片液,置于荧光显微镜下观察。
注意事项:
1、DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。
2、本产品需避光,并尽量避免反复冻融。
3、保存:-20℃,有效期至少2年
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。