Proteinase K,中文名为蛋白酶 K,不含DNase,不含RNase,可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组 DNA 抽提、酶的消化去除等。
酶活力>30U/mg,在 37ºC、pH 7.5 条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1µmol 酪氨酸所需蛋白酶 K的量,定义为一个单位(U)蛋白酶K酶活力。
在很宽的pH范围内有效,有效的pH范围为pH4.0-12.5,最佳pH范围为pH7.5-8.0。蛋白酶K的最佳反应温度为65℃,但在 65℃或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。
在 0.2-1%SDS 或约10mM 尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作浓度为0.05-1mg/ml,根据所用缓冲液是否含有 SDS、尿素、pH 是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。常用浓度的 EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K的活力影响不大。
操作步骤(仅供参考):
1、根据具体实验要求操作。
2、一般工作浓度为0.05~1mg/ml。
注意事项:
1、应避免反复冻融,以免酶活力下降。如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、-20℃储存,有效期1年
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考