GUS染色液(试剂盒）SH0724

产品内容：

产品说明：

X-Gluc（X-GlcA）分子量为521.8，CAS号为18656-96-7，是检测大肠杆菌中GUS基因的底物，可快速检测植物中GUS基因融合标记。GUS染色液在适宜的反应条件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液多用于转基因植物的GUS基因表达分析。

有效期：6个月

操作步骤(仅供参考)：

1、配制X- GlcA Solution：X- GlcA溶解于X-GlcA solvent,浓度350mg/ml，Vortex混匀，即为X-GlcA Solution。-20℃避光保存。

2、按下列比例配制GUS染色液：

3、固定(固定不是必须的步骤，如果不需要固定，直接进行操作步骤4)：

① 取转基因植物组织，加入到3-5ml左右清洁小瓶或多孔板中。

② 取适量2×Fixation Buffer等量稀释即获得1×Fixation Buffer。加入1×Fixation Buffer，使Fixation Buffer完全浸没组织。室温孵育，弃液。

③ 配制洗涤液：按GUS Buffer A:去离子水=1:20稀释，即为洗涤液。用配制好的洗涤液漂洗3次。每次1min

4、加入适量GUS染色液，使GUS染色液完全浸没组织。

5、用真空泵抽取小瓶或多孔板中的气体，抽取时间应大于2min。该步骤是为了抽取植物组织内的气体，并使染色液更容易进入组织内。

6、立即盖紧瓶子或多孔板，37℃孵育24h。随着孵育时间的延长，蓝色渐渐出现，当表达量较高时，GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。

7、用乙醇脱去样本的叶绿素，一般样本浸没于乙醇1-3h。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光学显微镜下观察。

注意事项：

1、配制好的GUS染色液可以4℃避光保存半个月。

2、X-GlcA Solution应避免反复冻融，否则染色效率会下降。

3、由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

备注：以上数据均来自公开文献, 仅供参考。