规格: 100mg/1g
英文名称: Collagenase Ⅴ
别名: Clostridiopeptidase A
CAS: 9001-12-1
酶活: 125 CDU/mg sold
外观: 深褐色粉末
来源: From clostridium histolyticum
溶解性: 5mg/ml Water
保存条件: -20℃,有效期3年。
产品说明:本产品仅用于科研,不可用于其他。
胶原酶Ⅴ(来源溶组织梭菌)包含至少 7 种蛋白酶成分,分子量从 68-130KD 不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,将结缔组织分离成单个细胞。消化软骨组织的浓度一般为 1-2mg/ml,消化肝脏组织大约 1mg/ml。 但是具体的消化浓度因种属特异性而异。很多文献指出胶原酶可以消化多种组织,胶原酶的使用浓度一般为0.1- 5mg/ml,消化过程中可以搅拌以促进酶的消化作用。胶原酶在消化的过程中可以引起 细胞的少量死亡,一般消化时间为15min至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首选的缓冲液为含钙离子和 BSA的Krebs Ringer Buffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量,同时可以加入0.5%BSA或5-10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。
胶原酶的灭菌首先离心或者用0.8µm的滤器去掉不溶物。然后再用0.2µm 的滤器过滤除菌。对于组织培养方面的应用,胶原酶可以用不含钙离子的溶液配制如Hanks,EBSS等。
酶保存液:
0.05-0.1mg/ml 胶原酶溶于50mM TES buffer,pH 7.4 (37℃) 含0.36mM 氯化钙。反应体系的终浓度为50mM TES,0.36mM 氯化钙,25 mg 胶原,0.005-0.01 mg 胶原酶。
稳定性:
酶液在含有 0.3-0.5mM 钙离子的中性 PH 条件下可以在37℃维持活性15小时。在-20℃可以维持数月。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。