固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
中性福尔马林固定液(10%)主要由甲醛、磷酸盐、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织的固定。
有效期:RT,12个月。
操作步骤(仅供参考):
按实验具体要求操作。一般标本固定时间控制在1~4h/mm,大标本应适当延长固定时间。固定好的组织,可在中性福尔马林固定液(10%)或70%乙醇中长期保存。
注意事项:
1、中性福尔马林固定液(10%)有一定刺激性和腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作, 避免吸入。
2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同。常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。