规格: 4×2mL/ 4×10mL
有效期:6个月
产品简介:
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适PH 9.2-9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮至溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在PH 9.2-9.8的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸和萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。改染液专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈红色,位于胞浆,结果较金属盐沉淀法可靠。
产品组成:
3×20ml | Storage | |||
试剂(A): NAP固定液 | 10ml | 20ml | RT 避光 | |
试剂(B):NAP孵育液 | B1:AS-BI染色液 | 25ml | 50ml | RT 避光 |
25ml | 50ml | RT | ||
B3:NAP buffer | ||||
临用时,取B1:B2:B3=1:1:2比例混合,成为NAP孵育液。即配即用。 | ||||
试剂(C): 苏木素染色液 | 10ml | 20ml | 4℃ 避光 | |
试剂(D):甲基绿染色液 | 10ml | 20ml | RT 避光 | |
使用说明书 | 1份 |
自备材料:
1、载玻片
2、显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、 制备新鲜血液或骨髓细胞涂片,NAP固定液固定30s,充分水洗。
2、滴加配制好的NAP孵育液,孵育15-20min,水洗。
3、苏木素染色液复染5-8min或甲基绿染色液复染3-5min。
4、水洗、晾干、镜检。
染色结果:
NAP活性颗粒---红色
细胞核---蓝色(苏木素)或绿色(甲基绿)
一般以积分报告结果,根据100个中性粒细胞阳性颗粒进行0-4计分。
细胞分值 | 染色特点 |
0 | 无颗粒 |
1 | 稍有颗粒 |
2 | 中等程度颗粒 |
3 | 多数颗粒 |
4 | 充满颗粒 |
注意事项:
1、血液或骨髓细胞涂片应新鲜,厚薄适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2、NAP孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、复染时,苏木素染色液或甲基绿染色液二者取其一。
4、每次染色时,应有阳性对照片。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。