规格: 5×20/ 5×50mL
有效期:6个月有效
产品内容:
5×20ml | 5×50ml | 保存 | |
试剂(A): PAS固定液 | 20ml | 50ml | RT避光 |
试剂(A): 过碘酸溶液 | 20ml | 50ml | 4℃ 避光 |
试剂(B): Schiff Reagent | 20ml | 50ml | 4℃ 避光 |
试剂(C): 亚硫酸钠溶液 | 20ml | 50ml | RT 密闭 |
试剂(E): Mayer苏木素染色液 | 20ml | 50ml | 4℃ 避光 |
产品简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该技术不仅能显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
糖原PAS染色液(细胞专用)利用真菌含有多糖,过碘酸氧化真菌壁上的多糖而暴露出醛基,醛基与无色Schiff结合呈现红色。该染色法性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需0.5h;浓度低过碘酸更适用于对真菌染色,无盐酸乙醇分化液分化步骤。
自备材料:
1、 蒸馏水
2、 系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、 细胞、骨髓涂片用PAS固定液固定10~15min。
2、 水洗、晾干。
3、 入过碘酸溶液,室温氧化15-20min。
4、 自来水冲洗2次,蒸馏水浸洗2次。
5、 入Schiff Reagent并加盖,置于室温阴暗处浸染10~20min。
6、 亚硫酸钠溶液滴洗2次,每次2min。该步骤亦可省略。
7、 流水冲洗2min。
8、 入Mayer苏木素染色液,复染3~5min。水洗、晾干、镜检。
染色结果:
PAS反应阳性物质(糖原或多糖) | 红色或紫红色 |
细胞核 | 蓝色 |
细胞质 | 深浅不一的红色 |
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
阴性对照(可选):
1、 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100ml,处理30~60min,与其他样本共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。
2、 (备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他样本共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。
3、 (备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。
注意事项:
1、 过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃最佳。
2、 过碘酸溶液、Schiff Reagent使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前30min取出恢复至室温,避光暗处使用。
3、 过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、细胞或组织的类别等决定。
4、 如常规切片建议用糖原PAS染色液,因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度都相对高。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。