试剂盒内容:
名称 | 规格 | 保存 |
试剂(A): Von Kossa硝酸银溶液 | 50ml | 4℃ 避光 |
试剂(B): 海波溶液 | 50ml | RT |
试剂(C): Von Kossa对照液 | 10ml | 4℃ |
产品说明:
钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法,本产品原理在于该法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。
操作步骤(仅供参考):
1、 组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。
2、 切片厚度5μm,常规脱蜡至水。
3、 蒸馏水洗1min。
4、 切片入Von Kossa硝酸银溶液强光照射15-60min。
5、 蒸馏水洗1min。
6、 入海波溶液处理2min。
7、 HE染色液或Van Gieson复染细胞核。
8、 常规脱水透明,中性树胶封固。
阴性对照(可选):
取另外一张连续切片脱蜡至水,置于Von Kossa对照液处理20min,流水冲洗5min。与实验片一同入Von Kossa硝酸银溶液,其余步骤同上。
染色结果:
钙盐:黑褐色至深黑色
注意事项:
1、 钙盐组织固定以中性福尔马林为佳。
2、 作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间。
3、 该染色法可以区分尿酸盐和钙盐,其原理在于钙盐不溶解于碳酸锂溶液,尿酸盐易溶解于碳酸锂溶液,切片经碳酸锂处理后,入硝酸银溶液并置于强光下,尿酸盐呈阴性反应。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。