英文名称: Prussian Blue Iron Stain Kit (with Eosin solution)
规格:2×50ml /2×100ml
有效期: 12个月
产品简介:Perls stain常用于显示局部组织内各种出血性病变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。
普鲁士蓝染色试剂盒(Perls stain,伊红法),其复染液采用伊红染色液,也是常用的复染液,该复染液染色时间较核固红染色液要短。
产品组成:
规格 | 2×50ml | 2×100ml | Storage |
25ml | 50ml | RT 避光 | |
Perls stain B | 25ml | 50ml | RT |
临用前,取A1、A2等量混合,即为试剂(A)Perls stain,不宜提前配制。 | |||
试剂(B) :伊红染色液 50ml | 50ml | 100ml | RT 避光 |
使用说明书 | 1份 |
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色
1、 切片脱蜡至水
① 二甲苯(Ⅰ) 5~10min
② 二甲苯(Ⅱ) 5~10min
③无水乙醇(Ⅰ)(可选) 3~5min
④无水乙醇(Ⅱ)(可选) 3~5min
⑤95%的乙醇 3~5min
⑥90%的乙醇 3~5min
⑦80%的乙醇 3~5min
⑧自来水或蒸馏水冲洗(Ⅰ) 1~3min
⑨自来水或蒸馏水冲洗(Ⅱ) 1~3min
2、染色
①切片入Perls stain(见注意事项6) 15~30min
②蒸馏水充分冲洗 5~10min
③伊红染色液淡染细胞核 15~30s
④自来水冲洗 1~5s
3、脱水、透明、封固
①90%乙醇 10~20s
②95%乙醇(Ⅰ) 1~2min
③95%乙醇(Ⅱ) 1~2min
④ 无水乙醇(Ⅰ) 2~3min
⑤无水乙醇(Ⅱ) 2~3min
⑥ 二甲苯(Ⅰ) 2~3min
⑦二甲苯(Ⅱ) 2~3min
⑧ 二甲苯(Ⅲ) 2~3min
⑨中性树脂封片。
(二)冰冻切片染色
1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3min。
2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
(三)细胞染色
1、4%多聚甲醛固定10~20min。
2、自来水冲洗2次,每次2min。
3、蒸馏水冲洗2次,每次2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果:
含铁血黄素或三价铁---蓝色
细胞核、其他组织---红色
阴性对照(可选)
取相同连续切片脱蜡至水。置于5%的草酸中,孵育2-6h后,经Perla stain,需要步骤同上。结果为阴性。
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净。
2、 组织固定常采用10%的中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。
3、 临用前取A1、A2液等量混合,即为试剂(A),现配现用,不可提前配制。
4、整个操作过程中容器要干净,避免使用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。
5、避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
6、Perls stain染色时,应根据样品情况调整着色时间。
7、 所有检查切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要.尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞).
8、95%乙醇、90%乙醇应经常更换新液。
9、 冰冻切片和细胞的染色,应根据具体情况摸索实验条件。
10、 为了您的健康和安全,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。