名称 | 2×10ml | 2×20ml | Storage | |
试剂(A): WG-KI固定液 | 10ml | 20ml | RT 避光 | |
试剂(B): 氧化WG-KI染色液 | B1: WG染色液 | 1.9ml | 3.8ml | RT 避光 |
B2: KI染色液 | 0.75ml | 1.5ml | RT 避光 | |
B3: WG-KI buffer | 7.5ml | 15ml | RT | |
临用前,按B1:B2:B3=5:2:20比例混合,即氧化WG-KI染色液,即配即用。 |
产品说明:
过氧化物酶(Peroxidase,简称POX或MPO)是由微生物或植物所产生的一类能催化很多反应的以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶氧化还原酶,主要存在于细胞的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。过氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)是经改良后的Pereira POX染色法,该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片过氧化物酶染色, POX活性部位呈棕红色至蓝黑色颗粒,定位于细胞质中。
操作步骤(仅供参考):
1、 血液、骨髓涂片干燥后,滴加WG-KI固定液布满血膜,固定30s。
2、 稍水洗,晾干或滤纸吸干。
3、 滴加配制好的POX孵育液,室温(20~25℃)避光孵育15min,水洗2min。
4、 滴加氧化WG-KI染色液,染色min。
5、 弃染色液,滤纸吸干。
6、 镜检。
染色结果:
阳性反应 棕红色至蓝黑色颗粒
阴性反应 胞质呈蓝色
细胞核 淡蓝色或淡紫红色
粒细胞系除早期原粒细胞阴性外,分化好的原粒细胞以下阶段细胞随细胞成熟而阳性反应增强,衰老中性粒细胞反应程度减弱单核细胞系弱阳性,淋巴细胞系为阴性。浆细胞及巨核细胞均为阴性。嗜酸性粒细胞和Auer小体呈强阳性反应。
阳性反应强度的判断:
阴性 | 无颗粒 |
弱阳性 | 颗粒小,分布稀疏 |
阳性 | 颗粒略粗,分布密集 |
强阳性 | 颗粒粗大,呈蓝黑色,充满胞浆 |
注意事项:
1、 血液或骨髓涂片应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2、 POX孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、 细胞较多或阳性反应较弱时,可适当延长染色时间,但一般不宜超过3min。AML-M3细胞染色时,应适当缩短染色时间。
4、 每次染色时,应采取健康人末梢血或骨髓涂片作为阴性对照。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。