英文名称: Rhodamine 123
别名:玫瑰红123;2-(6-Amino-3-imino-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid methyl ester
CAS: 62669-70-9
分子式: C21H17ClN2O3
分子量: 380.82
外观(性状): 红色至棕色粉末
溶解性: 溶于乙醇,1mg/ml
保存条件: -20℃ 避光保存
本产品仅用于科研,不可用于其他。
罗丹明123 是一种亲脂性阳离子荧光探针,能穿过活细胞的膜。线粒体内膜本身因富含负电性的糖蛋白而带负电荷,内膜外有大量质子积累造成外正内负的跨膜电位差。而罗丹明123 具有正电荷,由于电性相吸,特异的标记上线粒体。可用蓝光激发,被标记的线粒体发出绿色荧光。
罗丹明123 由于带阳离子所以当线粒体膜电位存在的时候就会聚集到线粒体上,而当膜电位下降的时候,聚集的罗丹明123 就减少,从而发光强度降低。
操作步骤(仅供参考):
溶液的配制:用DMSO溶解,终浓度为1-5 mM。溶液分装,避光保存于-20 ºC。
1. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为 5×104~5×105个/mL。
2. 孵育该载玻片,用 PBS或Hank’s 液洗涤细胞。
3. 用不含血清的培养基稀释 Rh123母液以制备1~20µM Rh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。
4. 将 Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育 30分钟至 1 小时。
5. 去除 Rh123 缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入 10%福尔马林缓冲液并孵育 15~20 分钟,接着用 PBS洗涤)。
6. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。。
注意事项:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。