浓度:1N
外观(性状): 澄清黄色液体
储存条件: 4℃避光保存,有效期1年
Folin -酚试剂的配制
1、Folin-酚试剂甲:将 1g Na 2 CO 3 溶于 50ml 0.2mol/L NaOH 中,再把 0.5g (硫酸铜) CuSO 4 ·5H2O 溶于100mL 1%的酒石酸钾钠(或酒石酸钠)溶液,然后将前者 50ml 与后者 1ml 混合,此试剂只能用一天,过期失效。
2、Folin-酚试剂⼄:本试剂的浓度为 1mol/L,此为 Folin-酚试剂应用液。Folin-酚试剂平时应密封贮存于4℃冰箱中避光保存。
操作方法(仅供参考):
以下步骤适用于蛋白浓度测定:
1)标准曲线的制作:取 14 支试管分成两组,分别加入 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL标准蛋白质溶液(250µg/mL),用水补足到 1mL,加入 5mL 试剂甲,混匀,于 20-25℃放置 10 分钟,再加入 0.5mL 试剂乙,立即摇匀,在 20-25℃保温 30 分钟,然后于 500nm 处比色。测定光密度值,取两组测定的平均值,以蛋白质浓度为横座标,光密度值为纵座标,绘制标准曲线值为定量的依据。
2)样品测定:取 1mL样品溶液(约合 20-250µg/多肽或蛋白质)加入5mL试剂甲混匀,于20-25℃放置 10 分钟,再加0.5mL试剂乙(Folin-酚),立即摇匀,在 20-25℃保温 30 分钟,然后于 500nm 处比色,以 1mL 水代替样品作空白对照。测定后,可以在标准曲线中查出未知样品的浓度。若用 0.5cm 光程的比色杯进行比色,可按下面方法进行操作:取 0.2mL样品溶液(约5-100µg 多肽或蛋白质)加入 1mL试剂甲(可选用 0.3-0.5cm 直径的小试管)混匀,10 分钟以后,再加入 0.1mL 试剂乙 ,立即混匀,30 分钟后比色。一般来说,若多肽或蛋白质的浓度在 2-25µg,测波长 755nm,而 25µg 以上则采用 500nm 比色为宜。
注意事项:
1、本说明书适用于蛋白定量检测,如需用于其他实验,请按参考文献进行。
2、本产品仅用于科研,不可用于其他。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考