产品说明:
DNA退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos),即DNA寡核苷酸退火缓冲液,该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA Oligo的退火,而且特别适合于较难退火的用于siRNA质粒构建的DNA Oligo的退火。使用DNA退火缓冲液(5×)可以有效避免DNA Oligo自身形成发夹结构,并且两条Oligo退火后可以直接和经酶切纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
使用本试剂操作非常简单,只需把待退火的DNA Oligo和DNA退火缓冲液(5×)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约60分钟即可完成。室温储存,有效期至少12个月。
操作步骤:
1、用去离子水将DNA退火缓冲液(5×)稀释成1×工作浓度。
2、用DNA退火缓冲液(1×)分别溶解互补的两条DNA寡核苷酸单链,使它们的摩尔浓
度相等。
3、取相同体积的步骤2中得到的寡核苷酸单链溶液混合,置于PCR反应管中,样品不要
用矿物油覆盖。
4、将PCR反应管置于PCR仪中,设置反应条件:95℃变性2min;缓慢降温至25℃,降
温过程用时至少45min;产物可4℃短暂保存,用于后续实验。长期保存可于-20℃冻存。
注意事项:
1、DNA退火缓冲液(5X) 只适合于DNA oligo的退火,不能用于RNA oligo 的退火。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考