规格:100ml/500ml
保存:-20℃保存,有效期 12个月
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA 等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
金克隆胰蛋白酶消化液系列产品,均溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。客户可根据具体需要选择不同的产品(具体成分见后表)。
本系列产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。
使用方法:
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置 1-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞需要适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
3.不宜 4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
4. 含酚红胰酶冰冻状态呈黄色,解冻后呈红色,属酚红特性乃正常现象。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:以上数据均来自公开文献, 仅供参考。